實驗室常用儀器—離心機

2019-09-16 15:06:30 82

  實驗室常用儀器—離心機

  離心機是利用離心力對混合液(含有固形物)進行分離和沉澱的一種專用儀器。實驗室常用電動離心機有低速、高速離心機和低速、高速冷凍離心機,以及超速分析、製備兩用冷凍離心機等多種型號。其中以低速(包括大容量)離心機和高速冷凍離心機應用最為廣泛,是生化實驗室用來分離製備生物大分子必不可少的重要工具。在實驗過程中,欲使沉澱與母液分開,常使用過濾和離心兩種方法。但在下述情況下,使用離心方法效果較好。

  ① 沉澱有粘性或母液粘稠。

  ② 沉澱顆粒小,容易透過濾紙。

  ③ 沉澱量過多而疏鬆。

  ④ 沉澱量很少,需要定量測定。或母液量很少,分離時應減少損失。

  ⑤ 沉澱和母液必須迅速分開。

  ⑥ 一般膠體溶液。

  1.電動離心機的基本結構和性能

  ① 普通(非冷凍)離心機

  這類離心機結構較簡單,可分小型台式和落地式兩類,配有驅動電機、調速器、定時器等裝置,操作方便。低速離心機其轉速一般不超過4000rpm,台式高速離心機最大轉速可達18000rpm。

  ② 低速冷凍離心機

  轉速一般不超過4000rpm,最大容量為2—4L,是實驗室最常用於大量初級分離提取生物大分子、沉澱物等。其轉頭多用鋁合金製的甩平式和角式兩種,離心管有硬質玻璃、聚乙烯硬塑料和不鏽鋼管多種型號。離心機裝配有驅動電機、定時器、調整器(速度指示)和製冷係統(溫度可調範圍為-20—+40℃),可根據離心物質所需,更換不同容量和不同型號轉速的轉頭。

  ③ 高速冷凍離心機

  轉速可達20000rpm以上,除具有低速冷凍離心機的性能和結構外,高速離心機所用角式轉頭均用鈦合金和鋁合金製成。離心管為具蓋聚乙烯硬塑料製品。這類離心機多用於收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸沉澱物以及免疫沉澱物等。

  ④ 超速離心機

  轉速可達50000rpm以上,能使亞細胞器分級分離,並用於蛋白質、核酸分子量的測定等。其轉頭為高強度鈦合金製成,可根據需要更換不同容量和不同型號的轉速轉頭。超速離心機驅動電機有兩種,一種為調頻電機直接升速,另一種為通過變速齒輪箱升速。為了防止驅動電機在高速運轉中產熱,裝有冷卻驅動電機係統(風冷、水冷),限速器、記時器、轉速記錄器等。此外,超速離心機還裝配有抽真空係統。

  2.使用注意事項

  (1) 通常離心機都會有登記表,請在使用前確實登記使用者、轉陀、轉速、時間 。

  (2) 離心管一定要平衡好,放入離心陀時也要注意位置平衡。絕對不要超過離心機或離心陀的最高限轉速。

  (3) 一定要在達到預設轉速後,才能離開離心機;若有任何異狀,要立刻停機。

  (4) 通常聽聲音即可得知離心狀況是否正常,也可注意離心機的震動情形。

  (5) 使用硫酸銨等高鹽溶液樣本後,一定要把離心陀洗幹淨,也要清理離心機轉艙。

  (6) 超高速離心機則因轉速極高,也更加複雜,需要另外的專門訓練才可使用。

  4.使用步驟,通常使用離心機前都要登記,請養成登記習慣。

  (1) 設定使用溫度 通常為4℃ 後,先把離心陀放入離心艙中,注意離心陀要卡好軸心;關上艙門,離心艙的溫度開始下降,預冷時間要充足。

  (2) 把樣本裝入適當的離心管,雙雙用天平平衡重量,蓋上離心管蓋子並旋緊。

  注意離心管隻裝七成滿,雖然加有蓋子,但也可能因離心力太強而外泄。

  大部分離心管都附有蓋子,注意離心管的蓋子也要一起平衡。

  離心管通常都會放在碎冰上,注意取出平衡時,要把碎冰的液體擦拭幹淨。

  落單的離心管要用另一隻裝有清水的離心管平衡。

  (3)把平衡好的離心管對稱地放入離心陀中,蓋上離心陀的蓋子,注意有無旋緊。

  若離心陀的蓋子沒旋緊,離心時會掉出來,造成很大的傷害!

  (4)關上離心機艙門,在儀表板上調好所要的轉速與時間例如 8,000rpm 30min 。

  注意所用轉速絕對不能超過離心陀的限定,最高轉速通常寫在離心陀上麵,例如:JIDI-20D 12×1.5ml角轉子,的最高轉速為20586rpm,但若離心機太老舊,必須往下調降。

  轉速與時間設定盡量不要太高,例如能使用7,000rpm 者就不要用 8,000rpm。

  (5) 確定所有步驟無誤後,按Start鈕開動,離心機漸漸加速,此時要密切監控。

  開始加速的時候最危險,若發現聲音不對,或產生大震動,請立刻按 Stop。

  (6) 等到離心達到所要的轉速後,確定一切正常才可離去。

  (7) 完成離心時,要等離心陀完全靜止後,才能打開艙門;請盡快取出離心管,先觀察離心管是否完全,以及沉澱的位置,盡速把上清倒出,小心不要把沉澱弄混濁。

  不管所要的是上清或沉澱,請取用幹淨的燒杯收集上清,以免有失誤。

  傾倒上清要很小心,以免把沉澱一起倒出來;若不慎混在一起,就要重來一次。

  若離心管有漏,要找出原因,並且立刻清理離心陀或離心艙。

  (8) 在兩次離心之間的空檔,不需取出離心陀,但蓋上艙門,勿讓熱空氣流入離心艙。

  (9) 全部使用完畢後,取出離心陀清理,可以用自來水衝洗,並且倒放晾幹。離心艙門要打開,等結冰融化後,再稍加擦拭及清理,若有液體漏出,要用清水洗之。也要回頭檢查平衡離心管的天平以及桌麵,很容易弄髒,要仔細清理幹淨才離開。


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